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en la exploración por MET y otra en el análisis por IF, conviene evitar que la epidermis se

desprenda de la dermis. Esto puede suceder incluso cuando se manipula cuidadosamente

la muestra durante el corte con un bisturí o una cuchilla de afeitar. El procesamiento de la

muestra para la exploración por MET suele requerir varios días, aunque existen métodos

rápidos para la realización de diagnósticos urgentes, en particular para el procesamiento de

muestras de piel fetal, para el diagnóstico prenatal [9].

Microscopia óptica

Antes de proceder a cortar los bloques de resina para la ultramicrotomía (el método utili-

zado para obtener cortes ultranos para la exploración por MET) deben obtenerse cortes

seminos (0,5-1,0 µm de espesor) para la exploración por microscopia óptica. Estos cortes,

cuando se tiñen de forma apropiada, aportan información valiosa sobre la conservación y

distribución del tejido. Asimismo, en ocasiones permiten obtener indicios del lugar de for-

mación de las ampollas, y de otros procesos, como la presencia de agregados intracelulares

de lamentos en el subtipo EB simple de Dowling-Meara (Fig. 1.4.1.3-1).

Microscopia electrónica

Para poder entender la importancia de cada uno de los lugares ultraestructurales de loca-

lización de la separación del tejido en el diagnóstico de la EB, es importante conocer con

detalle las características ultraestructurales de la unión dermoepidérmica, en particular de

la zona donde se encuentran los complejos de anclaje (Fig. 1.4.1.3-2). Independientemente

Fig. 1.4.1.3-1. Corte semino de una muestra de

piel obtenida por biopsia en un paciente con el

subtipo EB simple de Dowling-Meara. Obsérvese

que se ha producido una separación intraepidér-

mica en una zona muy profunda, por debajo de los

núcleos de las células basales. Las numerosas inclu-

siones citoplasmáticas de color azul oscuro obser-

vadas en las células basales y en las suprabasales in-

feriores corresponden a los cúmulos de lamentos

de queratina, los cuales se distinguen mejor en la

exploración por MET realizada con mayores au-

mentos (véanse Figs. 1.4.1.3-3 y -4). Tinción con

cloruro de metiltioninio y Azur II

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